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两种从固相树脂上切除多肽的方法

发布时间:2013/11/5 1:04:21  浏览次数:

 两种从固相树脂上切除多肽的方法
固相Fmoc化学合成多肽后,切割的方法有很多,现在介绍两种我们大家常用的基本类型。
1、强酸法(常用TFA)
将干树脂放在一个摇瓶中,加入适当量的含清除剂(Scavengers)切割试剂三氟乙酸(TFA),10-25ml/g树脂,盖上盖子,在室温下进行间歇式旋转震荡。抽滤树脂,以新的TFA清洗树脂2-3次,合并滤液,滴加8-10倍体积的冰乙醚。有时可以蒸掉部分TFA得到粗肽沉淀。乙醚可以用冰辅助降温来提高沉淀效率。最后,收集下沉淀出来的多肽粗品。


适用树脂:王树脂或Rink Amide树脂


2、弱酸法(稀释的TFA或醋酸)
1% TFA:
将1g 挂有多肽的树脂加入盛有含1%TFA的二氯甲烷溶液玻璃摇瓶,密封后震荡2分钟,用氮气将滤液压入另一个新的盛有含10%吡啶的甲醇摇瓶中,重复上述操作10次。用30ml DCM, 30ml MeOH先后顺序清洗残留在树脂上的保护多肽三次。以TLC或者HPLC检查清洗残留情况。合并所有滤液,并减压蒸掉溶剂剩5%体积。加40ml水,并用冰冷却混合物去辅助沉淀。过滤后,用清水清洗产品3次,放在真空干燥箱内用KOH或者P2O5进行干燥。
稀醋酸:
用AcOH/TFE/DCM(2:2:6)的切割液处理挂在树脂上的多肽2小时,过滤树脂,并用切割液洗涤树脂三次。混合滤液加入15倍体积的正己烷,旋蒸去除多余醋酸。多肽的回收方法详见下文。


适用树脂:2-CTC树脂

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